Fortis C18 色譜柱是常用、每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有的通用型色譜柱。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數(shù)化合物,包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。隨著每家色譜柱制造商的研發(fā),C18柱的類型還在不斷增加。適用pH范圍由原來(lái)的2~8,發(fā)展到現(xiàn)在1~14,與純水相的兼容性越來(lái)越好,某些色譜柱即使長(zhǎng)時(shí)間使用100%水相,也不會(huì)發(fā)生填料疏水塌陷。對(duì)于每位實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō),可供選擇的范圍日趨廣泛。
它的選用基本原則:
1、選用經(jīng)過(guò)烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。
2、選用含碳量高的柱子,增加保留值。
3、選用較短的柱子(如15cm,7.5cm)。
4、選用小顆粒度的填料。
5、對(duì)分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。
C18柱的規(guī)格對(duì)Fortis C18 色譜柱的影響
柱填料的選擇關(guān)系到色譜分離的可能性,而柱規(guī)格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測(cè)能力及每次分析的溶劑消耗等。
柱規(guī)格包括兩方面:柱內(nèi)徑和柱長(zhǎng)度。柱內(nèi)徑,分析型一般為2~6mm,制備型20mm,大者可達(dá)80mm;柱長(zhǎng)度,分析型5~30cm,制備型15~50cm。
一般來(lái)說(shuō),柱內(nèi)徑不影響分離度與分析時(shí)間的關(guān)系。今天,柱技術(shù)已發(fā)展到不同柱內(nèi)徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內(nèi)徑的柱子又各具特點(diǎn),對(duì)相同的分析時(shí)間和分離度來(lái)說(shuō),內(nèi)徑大的柱子比內(nèi)徑小的柱子多消耗溶劑。另一方面,較小內(nèi)徑的柱子對(duì)相同的檢測(cè)信號(hào)來(lái)說(shuō)所需樣品量亦較少。
因此,在樣品量有限的時(shí)候,可使用小內(nèi)徑柱。柱長(zhǎng)度增加雖可改善分離效果,但阻力也隨之增加,必須提高入口壓力。柱壓是同時(shí)影響增加分離度和減少分析時(shí)間的主要障礙。分離度、分析時(shí)間及柱壓三者相互制約,選擇好其中兩者,則第3個(gè)因素也就選好了。長(zhǎng)柱可以給出高分離度,短柱可提供快速分離,我們可以根據(jù)樣品情況去選用合適的色譜柱。